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詞條說明
什么是生物緩沖液?分子生物實(shí)驗(yàn)中怎樣選擇緩沖液?
生物緩沖液由弱酸(質(zhì)子供體HA)及其共軛堿(質(zhì)子受體A-)組成,在水中,HA 可分解為 A-和 H+,H+與水反應(yīng)形成 H3O+,在緩沖水溶液中,H3O+、HA和H+相互平衡存在,緩沖機(jī)制由兩個(gè)可逆反應(yīng)組成,其中質(zhì)子供體和質(zhì)子受體的濃度相等。 在實(shí)驗(yàn)過程中通過酶活性將強(qiáng)酸或堿引入該系統(tǒng)時(shí),來自引入的酸或堿的新離子(H+或OH-)被緩沖液吸收,pH值保持穩(wěn)定防止蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變。在一些生化實(shí)驗(yàn)
生物緩沖劑(Biological Buffer)之間的不同之處
Bicine 它是一種兩性離子緩沖液,它與許多常見金屬形成強(qiáng)絡(luò)合物;因此,穩(wěn)定常數(shù)選擇此緩沖液時(shí)應(yīng)考慮濃度。它可用于蛋白質(zhì)結(jié)晶的解決方案和作為移動(dòng)陽離子交換色譜中的相緩沖液和洗脫液。 MES 用于含金屬離子的溶液中,因?yàn)樗粫?huì)與大多數(shù)金屬形成絡(luò)合物。MES通常用于酵母,細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的緩沖培養(yǎng)基中,但濃度高于10 mM時(shí)對(duì)植物有毒。MES在各種色譜和電泳實(shí)驗(yàn)中也是很好的緩沖液選擇,因?yàn)樗@示出
生物緩沖液具有緩沖體系酸堿度維持pH的作用,主要應(yīng)用的生化實(shí)驗(yàn)和診斷檢測(cè)方面,除此之外,緩沖液在工業(yè)上也有很大的應(yīng)用,比如涂料、染料等。本文介紹緩沖液在植物染色過程中的應(yīng)用。 很多的染料對(duì)染浴的pH值是比較敏感的,染浴的pH值如果控制稍有不慎,便會(huì)出現(xiàn)色淺、色差、色花等染疵。為解決上述難題,需要在染浴的染液中添加適當(dāng)?shù)木彌_劑,來保持染液的pH值有良好的穩(wěn)定性。 織物染色需用緩沖劑調(diào)節(jié)pH的因素:
Tris(三羥甲基氨基甲烷)是生化實(shí)驗(yàn)中最常使用的緩沖液,因?yàn)樗泻玫木彌_能力、毒性低、對(duì)生物反應(yīng)的干擾極低,而且純度很高。有超過磷酸鹽的趨勢(shì),如在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中都已開始實(shí)驗(yàn)TRIS緩沖液,很少再用磷酸鹽。在分子生物實(shí)驗(yàn)中使用也很廣泛。 1、TRIS(三羥甲基氨基甲烷)的應(yīng)用 ① 在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定P值; ② 在凝膠中使用TRIS-HCL緩沖體系穩(wěn)定PH值; ③
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